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蛋白含量測定常用方法有哪些?蛋白純化是目前生物研究鄰域中較為熱門的一個大方向,其中蛋白含量測定是純化過程中很重要的一項內容。zui常用的蛋白含量測定分析方法有:馬斯亮藍法(Bradford)、Folin-酚試劑法(Lowry)、BCA法等。Folin-酚試劑法(Lowry):蛋白質在堿性溶液中肽鍵與Cu2+鰲合,形成蛋白質-銅復合物,還原酚磷鉬酸,產生藍色化合物,藍色深淺與蛋白質濃度呈線性關系。靈敏度在1-5μg/mL,是目前zui靈敏的測定方法,但耗費時間長,操作需嚴格計時,顏色深淺隨不同蛋白質而變化...
12-29 2021
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全面解析GST 親和層析概述谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)是生物體內的一類重要的代謝酶,參與外源和內源有毒物質的代謝。GST通過催化還原型的谷胱甘肽(GSH)和有毒物質偶聯反應,使有毒化合物的水溶性增加從而更容易排出體外,最終達到解毒的作用。利用這個原理,將GST做成標簽表達出融合蛋白,與帶谷胱甘肽配基的親和介質特異性結合,從而純化出目標蛋白,再用特異性的酶將GST標簽切除從而得到天然蛋白。GST標簽GST標簽是一種常見的標簽,它能夠增加外源蛋白的可溶性,很好地保留了蛋白的抗原性和生物活性,可在不同...
12-29 2021
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黃連含量的測定黃連是一種常用的中藥材,最早在《神農本草經》中便有記載,并列為上品。因其根莖呈連珠狀而色黃,所以稱之為“黃連”。其味入口極苦,有俗語云“啞巴吃黃連,有苦說不出”,即道出了其中滋味。黃連具有清熱燥濕,瀉火解毒之功效,用于治療濕熱痞滿,嘔吐吞酸,瀉痢,黃疸,高熱神昏,心火亢盛,心煩不寐,心悸不寧,血熱吐衄,目赤,牙痛,消渴,癰腫療瘡;外治濕疹,濕瘡,耳道流膿。文中參照《中國藥典》2020版一部黃連含量測定項下的方法,用月旭Ultimate®XB-C18色譜柱進行測定,結果...
12-28 2021
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距離“實驗室好物·囤貨狂歡季”活動結束僅剩10天!本次活動分為三部,點擊下方鏈接了解詳情!?經典活動心意滿滿!?雙重*驚喜翻倍!?大小儀器尊享優惠!漲價通知月旭科技深耕色譜行業十余年,能夠成為您及貴司的合作伙伴和能夠為生物醫藥、食品安全檢測、環境監測、精細化工等關系民生并處于快速發展的行業持之以恒的提供產品與服務,與有榮焉。近年來,整個行業快速發展,對企業創新及服務質量提出了更高的要求,為緊跟市場節奏,保障創新及產品服務質量,月旭科技在研發、原料、人力、運輸、安全等成本上持續加大投入。故此,為更好的維護各方合作關系,確保企業...
12-28 2021
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液相色譜,你問我答(九)1色譜柱填料孔徑大小對樣品檢測影響選擇什么樣填料孔徑的柱子是根據分子量的大小來確定的。填料孔徑對分離度的影響,120?的色譜柱通常適用的范圍為分子量2不同緩沖鹽試用完后對色譜柱維護通用方法流動相中含有緩沖鹽時,大的原則是:使用前要過渡,使用后要清洗(清洗包括兩個步驟,一個步驟是用來清洗緩沖鹽,另一個步驟是用來清洗強保留物質的),具體請按如下方式保養色譜柱。使用前的過渡:用乙腈:水=10:90(如果是甲醇體系則用甲醇:水=10:90)以1mL/min流速過渡30min,約7個柱...
12-28 2021
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影響凝膠色譜分離的因素凝膠的選擇各種凝膠在結構上是很相似的,都是三維空間網狀交織的高分子聚合物。分離程度主要取決于凝膠顆粒內部微孔的孔徑和混合物的分子量這兩個因素。微孔孔徑的大小與凝膠物質中凝膠濃度的平方根呈反比,與凝膠聚合物分子的平均直徑呈正比(其聚合物分子近似地當做球形)。和凝膠孔徑直接關聯的是凝膠的交聯度,交聯度越高,孔徑越小;反之,孔徑就大。移動緩慢的小分子物質,在低交聯度的凝膠上不容易分離,大分子同小分子物質的分離也宜用高交聯度的凝膠。葡聚糖凝膠的交聯度隨每克干燥凝膠的吸水量的增加而遞減...
12-28 2021
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“相塌陷”來的是如此突然在疏水作用色譜也就是反相色譜中經常能聽到的名詞,在實驗過程中的表現形式為,對物質沒有保留,出峰時間靠前,使得峰之間沒有保留。案例色譜柱:Ultimate®XB-C821.2×250mm,10μm。流動相:近似純水。第一天正常活化進樣色譜圖:晚上不進樣,由于流動相中沒有酸堿等添加劑,清洗自動進樣器后關機。第二天直接流動相沖洗2倍柱體積進樣色譜圖:(中間已經進樣過30多針)一切正常,由于實現了色譜柱自由,樣品也足夠干凈,為了下周一過來能更快做實驗,仍然清洗自動進樣器后關機...
12-27 2021
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氣相色譜填充柱的老化原則和安裝方法介紹氣相色譜填充柱因其高分離能力、高靈敏度、高分析速度等*優點而得到迅速發展。隨著彈性石英交聯毛細管柱技術的日益成熟和性能的不斷完善,已成為分離復雜多組分混合物、及多項目分析的主要手段,在各領域應用中大有取代填充柱的趨勢。現在新型氣相色譜儀、氣相色譜-質譜聯用儀基本上都是采用毛細管色譜柱進行分離分析。但是,柱內徑較小,固定液的膜薄,用于食品中殘留物分析時,若使用不當,色譜柱性能很快就會下降。氣相色譜填充柱的老化原則:1、設置老化溫度時,決不允許超過固定液的較高使用溫度。2、根據涂...
12-24 2021
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