非極性/中性化合物分析一般用有機(jī)溶劑和水。極性（特別是離子型）化合物分析時(shí)，通常需要在水中加入酸/堿或者緩沖鹽來調(diào)整流動相pH值以獲得對稱的峰形和合理的保留時(shí)間。

01 氫離子抑制法

● 對于弱酸（3≤pk_a≤7）/弱堿（7≤pk_a≤8）組分，一般通過調(diào)節(jié)流動相的pH來抑制目標(biāo)化合物的解離，以達(dá)到分離目的。弱酸的反相色譜保留值隨流動相pH值的減小而增大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)小于弱酸的pk_a值（pH＜pk_a-2）時(shí)，弱酸99%以上以分子形式存在，有利于在反相色譜柱上保留。

● 對于弱堿，情況相反（須pH＞pk_a+2）。因此分析弱酸樣品時(shí)，通常在流動相中加入少量酸性緩沖液，如三氟yi酸等（實(shí)例見圖1）；分析弱堿樣品時(shí)，則加入少量堿性緩沖液，如三乙胺等。

● 下表列出幾種常見緩沖鹽的pH值可用范圍。一般緩沖鹽濃度在5-50mmol/L范圍就夠用，濃度高的緩沖鹽（＞50mmol/L）雖然緩沖能力增強(qiáng)，但可能在與高比例有機(jī)相混合時(shí)析出，對液相色譜輸液泵等產(chǎn)生不利影響。