固相萃取過程解讀

更新時(shí)間：2021-12-10 點(diǎn)擊次數(shù)：2941

固相萃取(Solid-Phase Extraction，SPE)是一種樣品預(yù)處理技術(shù)，由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮。與傳統(tǒng)的液液萃取法相比，可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預(yù)處理過程，操作簡(jiǎn)單、省時(shí)、省力。液液萃取主要還是做一些弱極性或非極性的目標(biāo)物，對(duì)那些極性過強(qiáng)或者離子型目標(biāo)物并不適用，而且沒有除雜過程，處理后的樣本會(huì)含有非極性的雜質(zhì)，不但會(huì)污染色譜柱和儀器，也會(huì)造成一定的基質(zhì)效應(yīng)。固相萃取理論上非極性、極性、離子型目標(biāo)物都可以適用，這也是近年來固相萃取技術(shù)越來越流行的原因。

SPE固相萃取按照保留物質(zhì)分為類：一類為保留目標(biāo)化合物；另一類為保留雜質(zhì)（類似QuEChERS的前處理操作）。SPE固相萃取按照填料類型分為三類：非極性保留型；極性保留型；離子交換型。下圖為SPE處理過程。

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第一步：活化

SPE一般是用一定體積的有機(jī)試劑和一定體積的水溶性試劑進(jìn)行分步過柱來實(shí)現(xiàn)活化過程。活化有如下兩個(gè)目的：

通過有機(jī)試劑和水溶性試劑過柱來去除小柱中自帶的一些雜質(zhì)，避免系統(tǒng)污染和對(duì)上樣效果的影響。

使填料表面的官能團(tuán)更有序的舒展開，為后面的上樣液增大接觸面積，起到更好保留的作用。

活化之前高聚物的結(jié)構(gòu)排布是不規(guī)則的，很多結(jié)構(gòu)都是像“毛線團(tuán)"一樣緊緊抱在一起的。這就會(huì)造成很多官能團(tuán)被包裹在“線團(tuán)"里面，起不到很好的與目標(biāo)物接觸并起到保留作用。所以活化后這些結(jié)構(gòu)排布就會(huì)變得非常有秩序，增大了與目標(biāo)物的接觸面積，也就會(huì)很好的保留住目標(biāo)物了。

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第二步：上樣

經(jīng)過活化后，我們就可以把經(jīng)過預(yù)處理的樣本進(jìn)行上樣操作了。上樣后目標(biāo)物就會(huì)牢牢的被保留在SPE填料上，當(dāng)然也會(huì)有一些性質(zhì)和目標(biāo)物類似的雜質(zhì)被保留在SPE上。其余的雜質(zhì)就會(huì)直接隨著上樣液流出來。

第三步：淋洗

淋洗的目的就顧名思義了，就是把雜質(zhì)淋洗下來，避免對(duì)色譜柱和儀器的污染，也會(huì)減少雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)物檢測(cè)的干擾，這個(gè)減少干擾也就是所謂的減少基質(zhì)效應(yīng)。

第四步：洗脫

洗脫就是用試劑來破壞目標(biāo)物與填料間的作用力，從而將目標(biāo)物從填料上分離并收集起來。

第五步：氮吹復(fù)溶

此過程為可選步驟，通常有兩種情況會(huì)需要氮吹復(fù)溶操作。一是洗脫液與初始流動(dòng)相差別較大，如果直接進(jìn)樣的話可能會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的溶劑效應(yīng)，影響峰型，因此需要氮吹揮干后用初始流動(dòng)相復(fù)溶后進(jìn)樣分析。二是儀器檢測(cè)的靈敏度達(dá)不到實(shí)際樣品分析要求時(shí)，可氮吹揮干后用小體積復(fù)溶液復(fù)溶，增大目標(biāo)物濃度后再進(jìn)樣分析。

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